地黄生物技术研究

第1章 综述 1

1.1概述 1

1.2地黄生产中存在的问题 1

1.2.1地黄品种退化的原因 2

1.2.2地黄病毒病的危害 5

1.2.3防止地黄品种退化的措施 6

1.3地黄组织培养的研究进展 8

1.3.1以根为外植体 8

1.3.2以茎尖和茎段为外植体 9

1.3.3以叶片为外植体 10

1.3.4以花粉为外植体 10

1.3.5小结 11

1.4地黄种质资源保存的研究 13

1.4.1药用植物种质资源保存的意义 13

1.4.2药用植物种质资源的研究 14

1.4.3植物种质资源离体保存的研究 16

1.4.4地黄种质资源保存的现状 21

1.4本研究的目的和意义 21

第2章 材料与方法 24

2.1试验材料 24

2.2.1培养基及培养条件 24

2.2.2无菌苗的获得 24

2.3内源生长物质提取及检测 25

2.4数据处理 25

3.1前言 26

第3章 试管地黄的诱导 26

3.2材料和方法 27

3.2.1材料 27

3.2.2培养基及培养条件 27

3.2.3无菌苗的获得和幼苗的继代培养 27

3.2.4幼苗的生根培养 27

3.2.5试管地黄诱导培养 27

3.3结果与分析 28

3.3.1无菌体系的建立 28

3.3.2试管地黄的诱导 28

3.4讨论 40

4.1前言 43

第4章 试管地黄形成过程中内源激素变化的研究 43

4.2材料和方法 45

4.2.1材料 45

4.2.2方法 46

4.3结果与分析 49

4.3.1试管地黄不定根膨大过程中内源激素含量的变化 49

4.3.2试管地黄不定根迅速膨大时期各器官内源激素的含量 51

4.4讨论 52

第5章 地黄叶片器官形态建成的研究 56

5.1前言 56

5.2材料和方法 57

5.2.1材料 57

5.2.2培养基及培养条件 57

5.3.1叶片直接再生不定芽 58

5.3果与分析 58

5.2.4叶片直接再生植株和试管地黄的诱导培养 58

5.2.3无菌苗的获得和苗的继代培养 58

5.3.2从叶片直接诱导试管地黄 63

5.4讨论 66

第6章 地黄叶片器官形态建成中几种内源激素的变化 69

6.1前言 69

6.2材料和方法 70

6.2.1实验材料 70

6.2.2方法 71

6.3结果与分析 71

6.3.1地黄叶片器官形态建成中IAA含量的变化 71

6.3.3地黄叶片器官形态建成中ABA含量的变化 72

6.3.2地黄叶片器官形态建成中GA3含量的变化 72

6.3.4地黄叶片器官形态建成中JA含量的变化 73

6.4讨论 74

第7章 试管地黄形成过程中形态发生的研究 77

7.1前言 77

7.2材料和方法 78

7.2.1材料 78

7.2.2方法 78

7.3结果与分析 79

7.3.1试管地黄不定根初生结构的分化和早期的次生生长 79

7.3.2试管地黄块根的形成发育过程及其结构 80

7.3.3试管地黄与自然条件下生长的地黄的结构比较 81

7.4讨论 82

8.1前言 87

第8章 玻璃化法超低温保存地黄茎尖的研究 87

8.2材料和方法 89

8.2.1植物材料 89

8.2.2茎尖的预培养 89

8.2.3装载与脱水 89

8.2.4化冻、成活率检测与再生植株培养 89

8.2.5茎尖含水量测定 90

8.2.6可用性糖含量测定 90

8.3结果与分析 90

8.3.1蔗糖对预培养中茎尖含水量、可溶性糖含量和存活率的影响 90

8.3.2二甲基亚砜、乙酰胺对茎尖超低温冻存后成活率的影响 92

8.3.3PVS2预处理时间对茎尖超低温冻存成活率的影响 93

8.3.4茎尖大小对超低温冷冻成活率的影响 94

8.4讨论 95

8.3.5保存时间对茎尖存活率的影响 95

8.3.6茎尖植株的再生 95

第9章 讨论 97

9.1地黄试管块根的诱导与形成 98

9.2试管地黄诱导与内源激素的关系 99

9.3地黄叶片直接再生不定芽和不定根 102

9.4地黄叶片形态建成与内源激素的关系 103

9.5地黄试管块根解剖学结构 104

9.6地黄茎尖的超低温保存 105

9.7研究展望 107

附录一 药用植物离体无性繁殖方法 110

附录二 缩写词表 174

参考文献 175