医学免疫学与医学微生物学实验指导

第一篇 医学免疫学实验 3

实验一 凝集反应 3

实验二 沉淀反应 5

一、双向琼脂免疫扩散试验 5

二、对流免疫电泳试验 6

三、单向琼脂免疫扩散试验 7

四、免疫电泳试验 9

实验三 酶联免疫吸附试验 11

一、ELISA间接法 13

二、ELISA双抗体夹心法 13

实验四 巨噬细胞吞噬功能检测 15

实验五 外周血单个核细胞分离 17

实验六 T淋巴细胞分离鉴定 20

一、E花环形成试验 20

二、免疫磁珠分离法 22

三、流式细胞术分离法 23

实验七 T淋巴细胞转化试验 25

一、形态学检测法 25

二、3H-TdR掺入法 26

三、MTT法 27

实验八 溶血空斑试验（小室液相法） 29

实验九 直接免疫荧光法检测B淋巴细胞 31

实验十 白细胞介素-2的测定 33

实验十一 NK细胞杀伤功能测定 35

实验十二 免疫血清的制备及抗体纯化 37

实验十三 单克隆抗体制备 40

实验十四 细胞凋亡检测 45

一、形态学检测法 45

二、原位末端转移酶标记技术（TUNEL法） 46

第二篇 医学微生物学实验 51

实验十五 电子显微镜的原理与使用方法 51

实验十六 光学显微镜油镜的使用方法 53

实验十七 细菌形态与结构观察 56

实验十八 细菌动力的观察实验 58

实验十九 细菌的染色标本检查法 60

一、革兰（Gram）染色法 60

二、细菌的特殊结构染色方法 62

实验二十 细菌的人工培养方法 64

一、常用培养基的制备 64

二、细菌人工培养的接种方法 65

三、细菌生化反应检查法 69

实验二十一 细菌的分布 73

一、自然环境中细菌的检查 73

二、正常人体的细菌检查 73

实验二十二 外界因素对细菌的影响 75

一、物理因素对细菌的影响 75

二、化学因素对细菌的影响 77

三、细菌对抗生素的敏感性测定（琼脂扩散法） 77

实验二十三 病原菌的致病性试验 79

一、透明质酸酶的扩散作用 79

二、破伤风梭菌外毒素的毒性作用 79

三、血浆凝固酶试验（玻片法） 80

四、内毒素测定与鲎试验 80

实验二十四 体液的杀菌作用 82

一、溶菌酶试验（琼脂平板测定法） 82

二、正常血清的杀菌作用 82

实验二十五 病原性球菌 84

一、葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌形态及染色性 84

二、葡萄球菌、链球菌和肺炎链球菌培养特性 84

三、抗链球菌溶血素“O”试验 85

实验二十六 化脓性球菌脓汁的检查 87

实验二十七 肠道杆菌 88

一、肠道杆菌形态及染色性 88

二、肠道杆菌培养特性 88

三、肠道杆菌的生化反应及动力 89

实验二十八 粪便标本中致病性肠道杆菌的分离与鉴定 90

实验二十九 肥达试验 92

实验三十 需氧芽胞杆菌 94

一、炭疽杆菌和枯草杆菌的生物学特性 94

二、炭疽杆菌串珠试验（琼脂薄片法） 94

实验三十一 厌氧芽胞梭菌 96

一、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌和肉毒梭菌形态及染色性 96

二、产气荚膜梭菌“汹涌发酵”试验 97

三、产气荚膜梭菌动物试验 97

四、厌氧培养法 98

实验三十二 棒状杆菌 100

一、白喉棒状杆菌形态及染色性 100

二、白喉棒状杆菌培养特性 100

三、白喉棒状杆菌平板毒力试验 101

实验三十三 分枝杆菌 102

一、结核分枝杆菌培养特性 102

二、肺结核患者痰标本的直接涂片检查 102

实验三十四 立克次体 104

一、立克次体形态及染色性 104

二、血清学诊断方法——外-斐反应 104

实验三十五 螺旋体 106

一、螺旋体形态 106

二、暗视野显微观察钩端螺旋体的活动力 106

实验三十六 真菌 108

一、真菌基本形态及菌落特点 108

二、浅部真菌病临床标本直接镜检方法 109

实验三十七 病毒的形态学特点 111

一、病毒形态 111

二、狂犬病病毒包涵体 111

实验三十八 病毒的培养方法 112

一、动物接种法 112

二、鸡胚培养法 113

三、病毒组织培养法 115

实验三十九 流感病毒的血凝与血凝抑制试验 118

一、血凝试验 118

二、血凝抑制试验 119

实验四十 质粒DNA提取及琼脂糖凝胶电泳 122

一、碱裂解法提取质粒DNA 122

二、琼脂糖凝胶电泳 123

实验四十一 耐药质粒DNA转化试验 125

附录一 常用免疫学试剂的配制方法 127

附录二 常用染色液配制方法 131

附录三 常用培养基的制备 133

参考文献 138