创新研究实验 1 化学生物学实验

第一部分 创新实验 1

创新实验1人工金属核酸酶——邻菲罗啉铜配合物的合成及其与DNA作用 1

一、知识背景 1

二、实验目的 4

三、实验原理 5

四、仪器与材料 9

五、实验方法与步骤 10

六、数据处理 11

七、结果与讨论 11

八、注意事项 12

九、思考题 12

十、实验延伸 12

十一、参考文献 13

创新实验2金属β-内酰胺酶L1的表达及动力学表征 13

一、知识背景 13

二、实验目的 15

三、实验原理 15

四、仪器与材料 18

五、实验方法与步骤 19

六、数据处理 21

七、结果与讨论 21

八、注意事项 22

九、思考题 22

十、实验延伸 23

十一、参考文献 23

创新实验3大肠杆菌表达重组人粒细胞-集落刺激因子包涵体的PFLC复性与纯化 25

一、知识背景 25

二、实验目的 28

三、实验原理 28

四、仪器与材料 30

五、实验方法与步骤 30

六、数据处理 32

七、结果与讨论 32

八、注意事项 33

九、思考题 33

十、实验延伸 33

十一、参考文献 34

创新实验4多维色谱与MALDI-TOF-MS联用技术对人血清中低丰度蛋白的分离与鉴定 34

一、知识背景 34

二、实验目的 38

三、实验原理 38

四、仪器与材料 40

五、实验方法与步骤 40

六、数据处理 41

七、结果与讨论 41

八、注意事项 41

九、思考题 42

十、实验延伸 42

十一、参考文献 42

创新实验5罗丹明基“OFF-ON”型荧光探针对金属离子的识别特性及其生物学应用 43

一、知识背景 43

二、实验目的 45

三、实验原理 46

四、仪器与材料 48

五、实验方法与步骤 49

六、数据处理 50

七、结果与讨论 50

八、注意事项 51

九、思考题 51

十、实验延伸 51

十一、参考文献 51

创新实验6表面等离子共振技术测定叶酸与叶酸受体蛋白结合常数 52

一、知识背景 52

二、实验目的 53

三、实验原理 54

四、仪器与材料 55

五、实验方法与步骤 56

六、数据处理 58

七、结果与讨论 58

八、注意事项 58

九、思考题 58

十、实验延伸 59

十一、参考文献 59

创新实验7生物细胞膜的分离及其重要成分的分析 64

一、知识背景 64

二、实验目的 66

三、实验原理 67

四、仪器与材料 69

五、实验方法与步骤 70

六、数据处理 73

七、结果与讨论 73

八、注意事项 74

九、实验延伸 74

十、思考题 74

十一、参考文献 74

第二部分 化学生物学基础操作实验 75

基础操作实验1加样器的正确使用和校正 75

一、实验目的 75

二、实验原理 75

三、仪器与试剂 75

四、实验方法与步骤 75

基础操作实验2无菌操作的消毒灭菌与培养 76

一、实验目的 76

二、实验原理 77

三、仪器与材料 77

四、实验方法与步骤 78

五、结果与讨论 78

六、注意事项 78

七、思考题 78

基础操作实验3琼脂糖凝胶电泳检测DNA 79

一、实验目的 79

二、实验原理 79

三、仪器与试剂 81

四、实验方法与步骤 81

五、结果与讨论 81

六、注意事项 81

七、思考题 82

基础操作实验4大肠杆菌感受态细胞制备与质粒DNA的转化 82

一、实验目的 82

二、实验原理 82

三、仪器与材料 83

四、实验方法与步骤 83

五、结果与讨论 84

六、注意事项 84

七、思考题 84

基础操作实验5核酸的分离及其定量分析 84

一、实验目的 84

二、实验原理 85

三、仪器与材料 86

四、实验方法与步骤 87

五、结果与讨论 87

六、注意事项 88

七、思考题 88

基础操作实验6 Bradford法测定蛋白质含量 88

一、实验目的 88

二、实验原理 88

三、仪器与材料 89

四、实验方法与步骤 89

五、结果与讨论 90

六、注意事项 90

七、思考题 90

基础操作实验7高效液相色谱柱的装填与测试 91

一、实验目的 91

二、实验原理 91

三、仪器与材料 91

四、实验方法与步骤 92

五、结果与讨论 92

六、注意事项 92

七、思考题 92

基础操作实验8高效反相液相色谱过程热力学函数的测定 93

一、实验目的 93

二、实验原理 93

三、仪器与材料 94

四、实验方法与步骤 94

五、结果与讨论 94

六、注意事项 95

七、思考题 95

基础操作实验9体积排阻色谱法分离标准蛋白 95

一、实验目的 95

二、实验原理 96

三、仪器与材料 96

四、实验方法与步骤 97

五、结果与讨论 97

六、注意事项 97

七、思考题 97

基础操作实验10 MTT法检测秋水仙碱的细胞毒性 98

一、实验目的 98

二、实验原理 98

三、仪器与材料 99

四、实验方法与步骤 99

五、结果与讨论 100

六、注意事项 100

七、思考题 100

第三部分 化学生物学综合实验 101

综合实验1质粒DNA微量制备与鉴定 101

一、实验目的 101

二、实验原理 101

三、仪器与材料 103

四、实验方法与步骤 104

五、结果与讨论 105

六、注意事项 105

七、思考题 105

综合实验2外源基因体外扩增、质粒构建及其分析 105

一、实验目的 105

二、实验原理 105

三、仪器与材料 107

四、实验方法与步骤 108

五、结果与讨论 109

六、注意事项 109

七、思考题 110

综合实验3 SDS-PAGE及其蛋白质相对分子质量测定 110

一、实验目的 110

二、实验原理 110

三、仪器与材料 113

四、实验方法与步骤 114

五、结果与讨论 116

六、注意事项 116

七、思考题 116

综合实验4蛋白质的变性、凝固及其沉淀反应 117

一、实验目的 117

二、实验原理 117

三、仪器与材料 119

四、实验方法与步骤 120

五、结果与讨论 120

六、注意事项 121

七、思考题 121

综合实验5钙调蛋白的分离纯化 121

一、实验目的 121

二、实验原理 121

三、仪器与材料 122

四、实验方法与步骤 123

五、结果与讨论 123

六、注意事项 124

七、思考题 124

综合实验6一种天然无序蛋白质的表达、纯化及其构象变化 124

一、实验目的 124

二、实验原理 125

三、仪器与材料 126

四、实验方法与步骤 127

五、结果与讨论 127

六、注意事项 128

七、思考题 128

综合实验7弱阳离子交换蛋白折叠液相色谱法复性还原变性溶菌酶 128

一、实验目的 128

二、实验原理 129

三、仪器与材料 131

四、实验方法与步骤 131

五、结果与讨论 132

六、注意事项 132

七、思考题 132

综合实验8基于神经氨酸酶受体的分子对接 133

一、实验目的 133

二、实验原理 133

三、实验软件程序 134

四、实验方法与步骤 134

五、结果与讨论 135

六、思考题 135

综合实验9纳豆激酶及蚓激酶催化纤维蛋白降解反应的动力学 135

一、实验目的 135

二、实验原理 136

三、仪器与材料 136

四、实验方法与步骤 136

五、结果与讨论 136

六、注意事项 137

七、思考题 137

综合实验10功能切换型的防生物污染的表/界面构建 137

一、实验目的 137

二、实验原理 138

三、仪器与材料 138

四、实验方法与步骤 139

五、结果与讨论 140

六、注意事项 140

七、思考题 140

综合实验11药物作用后肿瘤细胞膜超微结构的原子力显微镜法 141

一、实验目的 141

二、实验原理 141

三、仪器与材料 142

四、实验方法与步骤 142

五、结果与讨论 142

六、注意事项 143

七、思考题 143

综合实验12荧光素类焦磷酸根离子荧光探针的制备及荧光性质 143

一、实验目的 143

二、实验原理 143

三、仪器与材料 144

四、实验方法与步骤 144

五、结果与讨论 145

六、注意事项 145

七、思考题 145

综合实验13 2，7-二氯荧光素的合成 145

一、实验目的 145

二、实验原理 145

三、仪器与材料 146

四、实验方法与步骤 146

五、结果与讨论 147

六、注意事项 147

七、思考题 147

综合实验14新型香豆素类荧光探针的合成与性能 147

一、实验目的 147

二、实验原理 148

三、仪器与材料 148

四、实验方法与步骤 148

五、结果与讨论 149

六、思考题 149

附录 150

附录一 化学生物学实验须知 150

附录二 实验记录及实验报告的书写 152

附录三 常用器皿的洗涤与处理 153

附录四 缩写、符号、换算系数和数据 155

附录五 重要分子的物理常数及性质 160