生物化学实验

第一章 生物化学实验基本知识 1

一、实验须知 1

二、实验室安全 2

三、实验室应急处理 2

四、配制溶液 3

五、实验误差与数据处理 5

六、实验记录及实验报告的书写 8

七、实验室常用仪器的使用 10

八、生物化学实验中的药品和试剂 18

九、实验样品的准备 27

第二章 现代生物化学实验技术 30

一、离心技术 30

二、层析技术 35

三、电泳技术 41

四、光谱技术 50

五、聚合酶链式反应（PCR）技术 55

第三章 生物化学实验 59

实验一 维生素A的测定 59

实验二 维生素B1的荧光测定 65

实验三 维生素B2（核黄素）的荧光测定法 67

实验四 果蔬维生素C含量测定及其分析 69

实验五 高效液相色谱法测定脂溶性维生素 73

实验六 叶绿素含量测定 76

实验七 粗脂肪的提取和测定 77

实验八 中药杏仁脂质成分的定量测定 79

实验九 脂肪的碱水解及组分鉴定 80

实验十 脂肪酸值的测定——碱滴定法 82

实验十一 脂肪碘值的测定 85

实验十二 血清胆固醇的测定 87

实验十三 蛋白质的基本性质 90

实验十四 蛋白质含量的测定 95

实验十五 凝胶色谱法测定蛋白质的相对分子质量 106

实验十六 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质 109

实验十七 蛋白质印迹（Western-blotting） 111

实验十八 大蒜细胞SOD的提取与分离 118

实验十九 淀粉的提取及性质实验 120

实验二十 淀粉与纤维素的测定 122

实验二十一 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 125

实验二十二 糖的硅胶G薄层层析 128

实验二十三 肝糖原的提取及鉴定 130

实验二十四 蒽酮比色法测定可溶性糖含量 131

实验二十五 基因组DNA的提取与检测 134

实验二十六 PCR基因扩增 139

实验二十七 谷物种子中赖氨酸含量的测定 141

实验二十八 瓦氏呼吸计法测定L-谷氨酸的含量 143

实验二十九 DNP-氨基酸的制备和鉴定 145

实验三十 DNS-氨基酸的制备和鉴定 148

实验三十一 大豆总异黄酮的提取及含量测定 151

实验三十二 细胞色素C的制备及其测定 153

实验三十三 酶促反应动力学 157

实验三十四 碱性磷酸酶的酶学性质分析 161

实验三十五 碱性磷酸酶及其突变体的结构与功能研究 165

第四章 综合实验 171

实验三十六 超氧化物歧化酶的分离、纯化 171

实验三十七 菜花（花椰菜）中核酸的分离和鉴定 176

实验三十八 血糖的测定 179

实验三十九 HPLC法检测水果中有机酸浓度 185

实验四十 大肠杆菌质粒DNA的制备及电泳鉴定 188

实验四十一 阿斯巴甜的合成与高效液相色谱纯化 192

实验四十二 溶菌酶的提取和系列性质测定 199

实验四十三 原花色素的提取、纯化与测定 212

附录 217

附录一 一些常用化合物的溶解度（20℃） 217

附录二 气体干燥剂 218

附录三 常用酸、碱溶液的配制 218

附录四 常用酸、碱的性质 218

附录五 常用缓冲溶液的配制 219

附录六 易变质及需要特殊方法保存的试剂 226

附录七 液体干燥剂 227

附录八 冷却剂 227

参考文献 228