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基因工程与分子生物学实验教程
  • 作 者:严海燕编著
  • 出 版 社:武汉:武汉大学出版社
  • 出版年份:2009
  • ISBN:9787307072466
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一、基础实验部分 3

实验一 植物基因组DNA的提取和酶切 3

实验二 动物组织总DNA的提取 10

实验三 大肠杆菌染色体DNA的提取 15

实验四 质粒DNA的提取、琼脂糖凝胶电泳鉴定和酶切 18

实验五 从琼脂糖中回收DNA片段 25

实验六 目的DNA与载体质粒的连接 28

实验七 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 30

实验八 重组质粒的转化和重组菌的筛选 33

实验九 多聚酶链式反应(PCR)扩增目的基因 37

实验十 Southern Blotting鉴定目的DNA片段 42

实验十一 植物中RNA的提取 47

实验十二 反转录及反向PCR检测特异基因的表达 53

实验十三 植物叶片总蛋白的提取 56

实验十四 蛋白质印迹 59

二、综合实验部分 67

实验十五 小片段基因组文库的构建 67

实验十六 目的DNA片段在基因组中存在和拷贝数的分析 69

实验十七 PCR克隆特异基因序列 71

实验十八 特异基因转录表达分析 72

实验十九 特异蛋白质表达分析 73

实验二十GFP和HSF4的融合蛋白在Hela细胞中的定位观察 75

实验二十一 利用分子生物学技术鉴定细菌 85

三、基因芯片技术 91

实验二十二 利用基因芯片鉴定细菌 91

实验二十三 应用基因芯片研究酵母菌热激反应基因表达谱的变化 108

四、附录 123

附录1 琼脂糖凝胶电泳分离技术 123

附录2 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 127

附录3 抗原抗体反应 129

附录4 纯化方法 130

附录5 储存液的配制 132

附录6 DNA和RNA的定量检测 136

附录7 本书中采用的英文缩写 137

附录8 微量移液器的使用 139

附录9 RedPrime DNA探针标记试剂盒操作方法 142

参考文献 144

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