医学免疫学实验

第1章 抗体制备技术 1

实验一 多克隆抗体的制备 1

一、抗体制备的流程 1

二、兔抗人全血清的多克隆抗体制备 3

三、兔抗羊红细胞的多克隆抗体制备 5

实验二 单克隆抗体的制备 6

实验三 抗体的纯化与保存 11

一、特异性抗体的纯化 11

二、IgG的纯化 11

三、IgM的纯化 15

四、SDS-PAGE法检测免疫球蛋白纯度 16

五、抗体的保存 17

第2章 抗原抗体反应 18

实验四 凝集反应 18

一、ABO血型的鉴定（玻片法） 18

二、SPA协同凝集试验——颗粒性抗原的检测 20

三、间接凝集抑制试验——妊娠检验 22

四、间接血凝试验 22

五、反向间接血凝试验 24

实验五 免疫沉淀反应 25

一、双向免疫扩散 25

二、单向免疫扩散 26

三、环状沉淀试验——血迹鉴定 28

四、琼脂凝胶对流免疫电泳 29

五、火箭免疫电泳试验 30

六、免疫浊度测定 32

实验六 补体结合试验 33

实验七 免疫印迹技术 35

第3章 免疫标记技术 39

实验八 酶免疫技术 39

一、酶联免疫吸附试验 39

二、酶免疫组织化学技术 42

实验九 荧光免疫技术 43

一、直接免疫荧光法——检测B细胞膜表面免疫球蛋白 43

二、间接免疫荧光法——检测痢疾杆菌 44

实验十 生物素-亲和素技术 46

第4章 免疫细胞检测技术 48

实验十一 人外周血单个核细胞分离及观察 48

实验十二 T细胞功能检测 49

一、T淋巴细胞转化试验 49

二、E花环形成试验 51

三、流式细胞术检测法 52

四、CTL介导的细胞毒试验 53

实验十三 B细胞功能检测——溶血空斑试验 55

实验十四 固有免疫细胞功能检测 56

一、炎症模型建立及细胞吞噬现象观察 56

二、NK细胞介导的细胞毒试验 58

第5章 细胞因子及其受体的检测 60

实验十五 白细胞介素-1的检测 60

实验十六 白细胞介素-2的检测 62

实验十七 白细胞介素-2受体的检测 63

一、可溶性白细胞介素-2受体的检测 64

二、膜结合型白细胞介素-2受体阳性细胞检测 65

实验十八 肿瘤坏死因子的检测 66

一、肿瘤坏死因子的含量检测 66

二、肿瘤坏死因子的活性检测 67

第6章 HLA分型技术 69

实验十九 补体介导的细胞毒试验 70

实验二十 混合淋巴细胞培养 71

实验二十一 PCR-SSP检测HLA-B27 72

实验二十二 HLA基因分型——限制性片段长度多态性法 73

第7章 免疫PCR技术 76

实验二十三 免疫PCR法检测人肿瘤坏死因子 76

第8章 超敏反应的检测 79

实验二十四 豚鼠过敏试验 79

实验二十五 青霉素过敏试验 80

实验二十六 血清IgE测定 81

一、血清总IgE测定 82

二、特异性IgE测定 83

实验二十七 自身抗体检测 83

一、抗核抗体检测 84

二、抗胰岛素抗体检测 85

实验二十八 循环免疫复合物检测 86

一、PEG沉淀法检测循环免疫复合物 86

二、含甲状腺球蛋白免疫复合物的测定 87

实验二十九 类风湿因子的检测 88

一、胶乳凝集试验测定类风湿因子 88

二、ELISA法测定类风湿因子 89

实验三十 结核菌素试验 90

实验三十一 植物血凝素皮肤试验 91

附录 93

附录Ⅰ 试剂的浓度 93

附录Ⅱ 常用免疫学检验正常值 94

附录Ⅲ 常用实验动物技术 96

附录Ⅳ 免疫学实验常用仪器 99

附录Ⅴ 免疫学常用试剂的配制 103

附录Ⅵ 实验室规则 106

附录Ⅶ 医学免疫学实验报告册 107

参考文献 122