核酸提取与纯化实验指南

第一章 概述 1

第一节 核酸提取与纯化的历史 1

第二节 核酸提取与纯化的现状 7

一、当前核酸提取与纯化的应用领域 7

二、当前核酸提取与纯化的常见方法 10

三、核酸提取与纯化存在的问题和解决方法 19

参考文献 22

第二章 动物核酸的提取与纯化 24

第一节 概述 24

第二节 动物基因组DNA的提取与纯化 25

一、动物组织材料的预处理 25

二、DNA提取的预处理 26

三、DNA提取的方法 29

四、DNA的纯化方法 34

五、DNA的检测和鉴定 37

第三节 动物RNA的提取与纯化 39

一、动物总RNA的提取与纯化 40

二、动物mRNA的提取与纯化 42

三、动物microRNA的提取与纯化 43

参考文献 45

第三章 植物核酸的提取与纯化 46

第一节 概述 46

一、应用于重要农艺性状功能基因的分离 46

二、应用于农业基因组学 47

三、应用于植物转基因技术及其改良品种 47

四、应用于植物染色体工程技术 48

五、应用于植物次生代谢产物的生产 48

六、应用于植物DNA分子标记辅助育种 49

七、应用于转基因食品的检测 49

第二节 植物基因组DNA的提取与纯化 49

一、植物组织材料的预处理 50

二、植物基因组DNA的提取 50

三、植物基因组DNA的纯化 52

四、植物基因组DNA的检测 53

第三节 植物RNA的提取与纯化 54

一、植物总RNA的提取与纯化 54

二、植物mRNA的提取与纯化 58

三、植物microRNA的提取与纯化 59

四、植物RNA的检测 60

参考文献 60

第四章 细菌核酸的提取与纯化 62

第一节 概述 62

第二节 细菌基因组DNA的提取与纯化 63

一、细菌基因组DNA小量制备 63

二、氯化铯法大规模制备细菌基因组DNA 64

三、细菌基因组DNA提取试剂盒（溶液法） 65

四、提取基因组DNA注意事项 67

五、基因组DNA鉴定 67

六、DNA的纯化 68

第三节 细菌RNA的提取与纯化 70

一、从革兰氏阴性细菌中分离高质量的RNA 71

二、从革兰氏阳性细菌分离RNA 72

三、从革兰氏阴性细菌中快速分离RNA 73

四、细菌RNA提取试剂盒 74

参考文献 76

第五章 病毒核酸的提取与纯化 77

第一节 概述 77

一、病毒的大小和形态 77

二、病毒的结构及化学组成 78

三、病毒的分类 79

四、病毒的复制过程 79

五、病毒纯度的标准 85

六、病毒提纯的一般原则 85

七、病毒核酸的应用领域和提取方法指导 91

第二节 病毒DNA的提取与纯化 93

一、病毒DNA单链及双链特点 93

二、具体的实验方法 96

三、检测和鉴定 98

第三节 病毒RNA的提取与纯化 100

一、病毒RNA的提取 100

二、具体的实验方法 103

三、检测和鉴定（电泳鉴定） 105

参考文献 106

第六章 其他核酸的提取与纯化 107

第一节 线粒体DNA与叶绿体DNA的提取与纯化 107

一、线粒体DNA的提取与纯化 109

二、叶绿体DNA的提取与纯化 114

第二节 质粒DNA的提取与纯化 117

一、质粒DNA的小量提取与纯化 120

二、质粒DNA的大量提取与纯化 124

第三节DNA片段的提取与纯化 129

一、酶切片段的提取和纯化 129

二、小片段DNA的提取和纯化：PCR产物等的提取纯化 136

三、cDNA的提取和纯化 139

四、带特殊标记的DNA的提取和纯化 144

第四节 其他RNA的提取与纯化 151

一、核糖体RNA的提取与纯化 152

二、RNA探针的提取和纯化 152

参考文献 153