- 作 者：王廷华，张连峰，董坚主编
- 出 版 社：北京：科学出版社
- 出版年份：2015
- ISBN：9787030437860
- 标注页数：147 页
- PDF页数：161 页
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第一章 基因沉默概论 1
第一节 基因沉默的概念、发现及分类 1
第二节 基因沉默的原理及发生 1
第三节 研究基因沉默的意义 4
第四节 基因沉默的应用 5
第五节 展望 5
第二章 基于化学合成法的siRNA干扰技术 6
第一节 什么是siRNA 6
第二节 靶序列确定及化学合成方法 8
第三节 siRNA转染细胞的方法及注意事项 11
第四节 siRNA有效片段筛选意义和方法 13
第五节 siRNA干扰效率检测与效果评价 14
第六节 siRNA在生物医学中的应用 14
第七节 问题与展望 15
第三章 microRNA沉默靶基因及其应用 18
第一节 microRNA的发现和基本概念 18
第二节 microRNA的结构与形成 18
第三节 microRNA与疾病 19
第四节 microRNA与siRNA的区别 20
第五节 microRNA的研究手段 21
第六节 microRNA功能分析确定 22
第七节 microRNA表达检测 23
第八节 microRNA研究展望 25
第四章 siRNA技术构建G6PD缺陷型A375稳转细胞株 26
第一节 G6PD缺陷型A375稳转细胞株的构建方法 26
第二节 A375-G6PD稳转细胞株的功能检测 30
第三节 A375-G6PD稳转细胞株的应用 30
第五章 基于PENK基因干扰克隆载体构建的RNA干扰技术 30
第一节 实验原理与实验目的 32
第二节 实验设备、试剂 32
第三节 实验步骤 34
第六章 α-突触核蛋白干扰技术 42
第七章 人类免疫缺陷病毒转染皮质神经元 64
第八章 单纯疱疹病毒转染原代皮质神经元和脊髓神经元 71
第九章 腺病毒转染原代皮质神经元和脊髓神经元 88
第十章 基因敲减理论与实验技术 93
第一节 基因敲减技术发展简史 93
第二节 基因敲减的概念 95
第三节 基因敲减的原理 95
第四节 基因敲减的应用前景 97
第五节 展望 97
第十一章 基因组编辑技术 98
第一节 显微注射技术 98
第二节 胚胎移植 101
第三节 转基因动物制作 104
第四节 基因打靶介导的敲除和敲入动物的制作 108
第五节 转座子技术在基因修饰中的应用 116
第六节 TALEN技术介导的敲除动物的制作 118
第七节 CRISPR/Cas技术介导的基因敲除动物的制作 120
第八节 克隆动物制作 123
第十二章 调控eIF-5A1的microRNA预测与验证 129
第一节 eIF-5A1靶microRNA的生物信息学预测 129
第二节 eIF-5A1靶microRNA荧光素酶报告实验验证 134