线粒体的分离与活性测定

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前言 1

一、线粒体的分离 1

1．动物细胞线粒体的分离 1

①鼠肝线粒体的分离 1

内容提要 1

②大鼠心肌线粒体的分离 3

③大鼠腿部骨骼肌线粒体的分离 5

④猪（牛）心线粒体的分离 5

2．植物细胞——玉米线粒体的分离 9

3．酵母线粒体的分离 11

二、线粒体的形态鉴定 16

1．相差显微镜观察 16

2．电子显微镜观察 17

三、线粒体的活性测定 18

①呼吸控制率（RCR）和氧化磷酸化效率（P/O或ADP/O比值） 19

1．测定线粒体活性的主要指标和方法 19

②32Pi—ATP交换活性 21

2．测定线粒体活性的几个实例 22

①用氧电极法测定呼吸控制率（RCR）和氧化磷酸化效率（ADP/O比值） 22

（1）鼠肝线粒体的测定 22

（2）其它细胞线粒体的测定 25

②用瓦氏检压法测定线粒体的氧化磷酸化效率（P/O比值） 28

（1）鼠肝线粒体的测定 28

（2）其它细胞线粒体的测定 31

③猪心线粒体32Pi—ATP交换活性的测定 33

四、附录 37

1．蜗牛酶的制备 37

2．简法制备己糖激酶 39

3．放射性磷（32Pi）的处理方法 42