生命科学综合实验 miRNA-X的克隆和功能分析

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概述 1

实验1 特定miRNA-X的生物信息学分析 5

实验1（1） GenBank,EMBL,DDBJ等核酸序列数据库的使用 5

实验1（2）利用BLAST软件进行双序列比对，利用Gene Ontology和KEGG等数据库注释基因的功能和参与的通路 8

实验1（3）蛋白质相关数据库（序列数据库、蛋白质三维结构数据库）的使用 15

实验1（4）对特定miRNA-X的生物信息分析 17

实验2 人工合成shRNA与pSuper载体的体外连接与转化 21

实验3 重组质粒DNA的抽提纯化、鉴定及测序 26

实验4 转染真核细胞及CCK-8法检测细胞活力 31

实验5 RNA的抽提纯化、鉴定及RT-PCR 35

实验6 Western blot检测蛋白质的表达及含量 44