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生物学基础实验教程  第3版  2  遗传学实验、生物化学实验、分子生物学实验
  • 作 者:滕利荣,孟庆繁主编
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2008
  • ISBN:9787030220578
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第三版前言 3

第二版前言 3

第一版前言 3

第一篇 遗传学实验 3

实验一 植物细胞有丝分裂的制片与观察 3

实验二 减数分裂的制片与观察 6

一 玉米减数分裂的制片与观察 6

二 蝗虫减数分裂的制片与观察 8

实验三 植物多倍体诱发 11

实验四 染色体畸变的制片与观察 13

一 染色体结构变异的制片与观察 13

二 染色体数目变异的制片与观察 14

实验五 链孢霉有性杂交的四分子分析 16

实验六 植物组织培养 19

实验七 植物染色体组型分析 22

实验八 小麦有性杂交技术 25

实验九 数量性状的遗传分析—遗传率的估算 28

实验十 群体等位基因频率估算及遗传平衡分析 31

实验十一 植物基因组DNA的提取、鉴定与转化 33

一 植物基因组DNA的提取方法 33

二 植物基因组DNA的质量鉴定和浓度估测 35

三 感受态细胞的制备及目的DNA的转化 35

实验十二 果蝇的饲养及性状、性别的观察 38

实验十三 果蝇的杂交实验 41

一 果蝇的单因子遗传 41

二 果蝇的双因子遗传 43

三 果蝇的伴性遗传 45

四 基因的连锁与交换 48

五 果蝇的三点实验和基因定位 50

实验十四 果蝇唾腺染色体制片与观察 53

实验十五 蟾蜍骨髓染色体制备与观察 55

实验十六 小白鼠染色体技术 57

一 骨髓染色体制备与观察 57

二 活体姊妹染色单体色差方法 58

三 染色体C-带显带方法 60

实验十七 人的染色体技术 62

一 外周淋巴细胞培养及染色体制片 62

二 染色体G-带显带方法 64

三 姊妹染色单体互换的制片与观察 65

实验十八 设计创新实验 67

第二篇 生物化学实验 71

实验一 啤酒酵母蔗糖酶的提取、分离纯化、性质鉴定及反应动力学 71

一 啤酒酵母蔗糖酶的提取及分离纯化 71

二 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 75

三 紫外分光光度法测定蛋白浓度 77

四 蔗糖酶活力的测定 79

五 蔗糖酶纯度和相对分子质量的测定—SDS-PAGE电泳法 81

六 用正交试验设计法测定几种因素对蔗糖酶活性的影响 87

七 蔗糖酶米氏常数Km最大反应速率Vmax值的测定和抑制剂常数Ki 91

实验二 亲和层析法纯化胰蛋白酶 98

实验三 酶谱分析技术分析纤维素酶 102

实验四 大豆蛋白的提取与含量测定 107

一 大豆蛋白的提取 107

二 微量凯氏定氮法测定蛋白质含量 109

三 蛋白质含量的测定—Folin-酚法 113

四 双缩脲法测蛋白含量 114

五 大豆蛋白的氨基酸分析 115

实验五 N末端氨基酸分析—DNS-Cl法测定蛋白质及肽的N末端氨基酸 117

实验六 细胞色素c的制备及测定 122

实验七 核酸的提取及核苷酸的分离 127

一 动物组织核酸的提取及含量测定 127

二 植物组织核酸的提取及含量测定 130

三 酵母RNA的提取及含量测定 133

四 离子交换柱层析分离核苷酸 134

实验八 维生素B2和维生素C的含量测定 138

一 维生素B2含量测定 138

二 维生素C的含量测定 139

实验九 L-谷氨酸的酶促脱羧作用(测压法测定L-谷氨酸) 142

实验十 三羧酸循环中间产物对酵母耗氧率的影响 146

实验十一 脂肪、糖及氨基酸反应的定性实验 148

一 脂肪酸的β-氧化 149

二 脂肪转化为糖的定性实验 150

三 肌糖原的酵解作用 151

四 氨基移换反应的定性实验 153

实验十二 设计创新实验 156

第三篇 分子生物学实验 159

实验一 腺嘌呤脱氨酶基因工程菌的构建、蛋白的表达、纯化及鉴定 159

一 目的基因的获得 161

二 目的基因的亚克隆 162

三 重组质粒的构建 166

四 重组质粒的转化、筛选和鉴定 170

五 蛋白的表达、纯化及鉴定 173

实验二 头发中抽提DNA并用PCR-RFLP法鉴定CYP2C9基因型 177

实验三 植物基因组DNA、总RNA的提取及相对分子质量测定 181

一 植物基因组DNA的提取 1

二 植物总RNA的提取 182

实验四 蛋白质印迹分析(Western blot analysis) 185

实验五 DNA探针的制备和标记 188

实验六 Southern印迹法 191

实验七 RNA的Northern杂交 196

实验八 真核生物cDNA文库的构建和分析 199

实验九 电穿孔法转染哺乳动物细胞 204

实验十 转基因动物 206

实验十一 RNA甲醛变性电泳 211

实验十二 RT-PCR扩增目的基因 213

实验十三 聚合酶链式反应—单链构象多态性检测(PCR-SSCP) 216

实验十四 PLPR启动子表达载体表达目的基因 219

实验十五 设计创新实验 222

主要参考文献 223

附录 225

附录1 遗传学实验常用试剂、培养基的配制 225

附录2 设计创新实验程序与要求 226

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