生物学基础实验教程

第一篇　植物生物学实验 3

实验一　植物组织、器官的结构观察 3

一　植物组织的结构观察 3

二　被子植物营养器官的结构观察 6

三　被子植物繁殖器官的结构观察 10

实验二　植物理化性质的测定 19

一　植物组织水势的测定（小液流法） 19

二　植物呼吸强度的测定（小篮子法） 20

三　叶绿素的提取及性质测定 21

四　种子发芽率的快速测定 23

实验三　种子植物标本的采集、制作与保存 26

实验四　设计创新实验 29

第二篇　动物生物学实验 33

实验一　动物解剖及形态观察实验 33

一　眼虫及草履虫观察 34

二　蛔虫解剖及横切片观察 36

三　蝗虫外形及内部解剖 37

四　鲤鱼外形及内部解剖 40

五　蟾蜍外形及内部解剖 44

六　家鸡外形及内部解剖 49

七　家兔外形及内部解剖 52

实验二　动物机能实验 57

一　呼吸运动调节 58

二　心搏的观察、描记及期前收缩和代偿间歇 60

三　坐骨神经-腓肠肌标本制备及骨胳肌收缩性质的观察 61

四　蛙心室肌细胞动作电位以及心电与心肌收缩的时相关系 64

五　神经干的动作电位、传导速度及兴奋性测定 66

六　反射弧的分析 69

七　小脑受伤动物运动功能障碍的观察 70

八　大脑皮层运动机能定位 71

九　血压调节 72

十　去大脑僵直 75

实验三　人体机能检测实验 77

一　人体心音听诊 79

二　人体血压和肺活量测定 80

三　人体血型的鉴定 83

实验四　设计创新实验 85

第三篇　微生物学实验 89

实验一　土壤中微生物的分离纯化、培养观察及保藏 89

一　常用培养基的制备、灭菌 93

二　土壤中微生物的分离纯化及培养技术 103

三　细菌的形态观察 109

四　细菌细胞的生理生化反应 117

五　大肠杆菌生长曲线的测定 120

六　放线菌、霉菌和酵母菌的形态观察 121

七　微生物的测微技术 126

八　微生物菌种的保藏 128

实验二　厌氧菌的培养技术 135

一　用厌氧袋法培养丙酮丁醇梭菌 135

二　厌氧罐培养法 138

三　针筒厌氧培养法 140

实验三　细菌细胞数量的测定 144

一　直接计数法 144

二　光电比浊计数法 146

三　平板菌落计数法 147

四　多管发酵测定法 150

五　干重比色测定法 152

实验四　微生物诱变及突变株的筛选 155

一　紫外线与亚硝基胍的诱变效应 155

二　抗药性突变株的筛选 158

三　酵母菌营养缺陷型的筛选 160

实验五　昆虫病毒多角体的染色与观察 165

实验六　大肠杆菌噬菌体的分离、纯化及效价测定 167

实验七　动物病毒的鸡胚培养 169

实验八　抗菌肽效价的生物测定 172

实验九　乳酸发酵与乳酸菌饮料的制备 176

实验十　响应面法优化大肠杆菌的发酵条件 179

实验十一　利用微生物快速测定仪对微生物进行分类 183

实验十二　细菌的药敏试验——纸片扩散法 185

实验十三　柯赫法则——病原接种与致病性证实实验 188

实验十四　葡萄球菌的分离与鉴定 190

实验十五　设计创新实验 192

第四篇　细胞生物学实验 195

实验一　徒手切片、装片、涂片的制作及细胞结构的观察 195

一　徒手切片的制作及植物细胞观察 195

二　肠系膜装片的制备及脂肪细胞的染色观察 199

三　血细胞涂片的制备及细胞形态观察 201

四　活体染色及线粒体、液泡系的观察 202

五　细胞内酸性蛋白质和碱性蛋白质的观察 205

实验二　石蜡切片的制备及细胞的染色观察 207

一　石蜡切片的制备 207

二　细胞内多糖的PAS反应 213

三　DNA的Feulgen反应 214

四　Brachet反应——细胞内DNA、RNA的显示 216

实验三　细胞器的荧光标记技术 218

一　荧光显微镜观察口腔上皮细胞 218

二　细胞骨架的荧光标记 219

三　纺锤体的免疫荧光标记 224

四　利用脂质体的转染技术对HeLq细胞中重组GFP进行观察 226

实验四 电镜制片技术 228

一　超薄切片的制备 228

二　扫描电镜样品的制备 232

实验五　免疫胶体金技术 234

实验六　植物组织及细胞的培养 236

一　植物愈伤组织的诱导及分化 236

二　植物细胞的悬浮培养 238

三　原生质体的分离、融合与培养 239

实验七　动物细胞的培养 244

一　贴壁细胞的传代培养 244

二　小鼠胚胎细胞的原代培养 245

三　细胞的融合 246

四　细胞冻存与复苏 248

实验八　细胞的分离与鉴定 250

一　细胞器的分级分离 250

二　玉米线粒体的分离与观察 254

三　叶绿体分离及离体叶绿体对染料的还原作用 255

实验九　细胞生理性质实验 257

一　细胞膜透性观察 257

二　巨噬细胞吞噬现象的观察 258

实验十　细胞凋亡相关实验 260

一　细胞凋亡的形态学观察 261

二　凋亡细胞的碘化丙啶（PI）排斥分析法 261

三　细胞群染色体DNA断裂的测定 262

实验十一　利用RT-PCR技术检测HeLa细胞中β-actin的表达 265

实验十二　新生大鼠心脏细胞的分离和培养 268

实验十三　哺乳动物早熟染色体凝聚诱导 271

实验十四　设计创新实验 273

第五篇　免疫学实验 277

实验一　淋巴细胞功能检测 277

一　淋巴细胞的分离和计数 277

二　T淋巴细胞功能检测——转化试验 278

三　B淋巴细胞功能检测——溶血空斑试验 279

实验二　NK细胞功能检测 281

实验三　抗体的制备——多克隆抗体的制备 283

一　抗原的制备和纯化 283

二　动物的免疫 285

三　免疫血清的分离和纯化 286

四　血清抗体效价的测定 286

实验四　抗体的制备——单克隆抗体的制备 287

实验五　抗原抗体反应——凝集反应 292

直接凝集法测血型抗体效价（示范教学） 292

实验六　抗原抗体反应——沉淀反应 294

一　单向免疫扩散（single immunodiffusion） 294

二　双向免疫扩散（double immunodiffusion） 295

三　免疫电泳（immunoelectrophoresis） 296

实验七　抗原抗体反应——补体介导细胞毒实验 298

实验八　免疫标记技术——ELISA（间接法） 300

实验九　免疫标记——免疫组织化学技术 302

实验十　免疫标记——免疫印记杂交技术 304

实验十一　细胞因子检测技术 307

实验十二　设计创新实验 309

主要参考文献 311

附录 313

附录1　玻璃仪器的洗涤及各种洗涤液的配制 313

附录2　培养基的常规配制程序 315

附录3　微生物学实验试剂和溶液的配制 319

附录4　微生物学常用染液的配制 320

附录5　微生物学实验常用培养基的配制 322

附录6　细胞生物学培养基剂配制方法 328

附录7　细胞生物学实验试剂配制 331

附录8　设计创新实验程序与要求 340