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分子生物学及基因工程实验教程
  • 作 者:刘箭编著
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2008
  • ISBN:9787030213686
  • 标注页数:85 页
  • PDF页数:96 页
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第一部分 基础性实验 1

实验1质粒的分离——碱性SDS法 1

实验2 Silica硅石粉法纯化质粒 4

实验3离心柱法提取质粒DNA 7

实验4质粒的提取——煮沸法 9

实验5核酸琼脂糖凝胶电泳及“玻璃奶”法纯化回收DNA片段 11

实验6离心柱法回收琼脂糖凝胶中DNA片段 14

实验7 DNA片段的连接(向质粒载体中插入外源DNA) 16

实验8 E.coli感受态细胞的制备、转化及转化子的鉴定(蓝白斑筛选法) 18

实验9聚合酶链式反应(PCR)技术 21

实验10菌落PCR方法快速筛选细菌重组子 23

实验11重组子的插入方向鉴定(酶切法) 26

实验12噬菌体铺板 28

实验13 M13噬菌体DNA的提取 31

实验14 SDS法小量提取植物基因组DNA 34

实验15 CTAB法小量提取植物基因组DNA 36

实验16动物组织细胞基因组DNA提取 38

实验17血液基因组DNA的纯化分离 40

实验18 Trizol试剂快速提取(动)植物总RNA 42

实验19总RNA的变性琼脂糖凝胶电泳检测 44

第二部分 综合性实验 46

实验20反转录PCR 46

实验21植物启动子表达的组织特异性——β-葡萄糖醛酸糖苷酶(GUS)组织化学染色 49

实验22外源基因在原核细胞中表达及分析——谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白质的表达及纯化 51

实验23外源基因在原核细胞中表达及分析——His6标记蛋白质的原核表达和纯化 56

实验24Western-blotting分析 59

实验25高灵敏Western-blotting分析(化学发光法) 65

第三部分 研究性实验 68

实验26地高辛标记探针的Southern杂交 68

实验27菌落原位杂交 73

实验28转基因植物的PCR检测 76

实验29花序浸泡法转化拟南芥及转化子的筛选 79

实验30叶盘法转化烟草 82

参考文献 85

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